農藥殘留的檢測在(zài)紫外可(kě)見分光光(guāng)度(dù)計、分光(guāng)光(guāng)度計檢測方麵,已(yǐ)經取(qǔ)得了很大進步,紫外(wài)可見(jiàn)分光光(guāng)度計靈敏度的提高,穩定性的提(tí)高給予農藥殘(cán)留的檢測能力(lì)、檢測限、覆(fù)蓋範圍等帶來了非(fēi)常大的提升。(如雙(shuāng)光束紫外(wài)可見分光光度計UV1901PC)具(jù)備雙光束光學係統,參比和樣品可同時放入,提高了分析效率和準確性。有利於加強農藥殘留(liú)監控力度(dù)。同時UV1901PC雙光束紫外(wài)可見分光光度計具(jù)備單(dān)機掃描(miáo)(隨開機,隨(suí)掃描),自動繪(huì)製標準(zhǔn)曲線(一種殘留元素,隻需做一次標準曲線(xiàn),可儲存於紫外可(kě)見分(fèn)光光(guāng)度計本機中(zhōng),使用時調出。方便實用(yòng)),單機多波長(一個樣品同(tóng)時測出不同波長的數值。減少實驗時間(jiān)和操作步驟),動力學等(děng)功能(觀察樣品時間上的變(biàn)化,可長達(dá)10個小時)。
本方法適用(yòng)於蔬菜、水果、相應食(shí)物、水及中毒殘留物中有機類和氨基甲酸酯(zhǐ)類農藥殘留的(de)檢測。
一定條件中(zhōng),氨基甲酸酯類農(nóng)藥、有機磷(lín)對膽堿酯酶有抑製作用,抑製率(lǜ)與農藥(yào)的濃度(dù)呈正比(bǐ)。用分光光度計測農殘的方法其實(shí)是利用酶催化乙酰膽堿水解產(chǎn)物(wù)與顯色劑生成黃色(sè)物質,其物質在紫外412nm波長處有(yǒu)吸收(shōu),可以利用紫外可見分光(guāng)光度計測定其(qí)吸(xī)光度隨時間(jiān)的變(biàn)化值(使(shǐ)用(yòng)UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計動力學功能操作簡便)得出蔬菜中含(hán)有機磷或氨基甲(jiǎ)酸酯類農殘留量的(de)情況。
主要儀器(qì):
分光光度計/紫外(wài)可見分(fèn)光光度計,電子(zǐ)天平,移液槍及配(pèi)套管嘴(zuǐ),冰箱,超聲波提取儀(yí)/萃取儀/處(chù)理(lǐ)器(FS-600N)
試(shì)劑
PH8.0緩衝(chōng)溶液 分別稱(chēng)取11.9g無水磷酸氫二鉀和(hé)3.2g磷(lín)酸(suān)二氫鉀,溶(róng)解於1000ml蒸餾水中。
顯色劑 分(fèn)別稱取(qǔ)160mg5,5-二硫(liú)代2-(硝基苯(běn)甲(jiǎ)酸)(DTNB)15.6mg碳酸(suān)氫鈉(nà),溶解於20ml緩衝溶液(yè)中(zhōng),4℃冰箱中保(bǎo)存。
底物 稱取125mg碘化硫代丁(dīng)酰膽(dǎn)堿,溶解於15ml緩衝液中,搖(yáo)勻後置4℃冰箱中保存備(bèi)用(yòng)。保存期不超(chāo)過兩周(zhōu)。
丁/乙酰(xiān)膽(dǎn)堿酯酶 根據酶的活性情況,用緩衝液溶解,3min內(nèi)的吸光度(dù)變化(huà)控製在0.4~0.8。搖勻(yún)後置4℃冰箱中保存備用。
操作步驟
樣品處理 選取有代表性的蔬菜樣品,衝(chōng)洗掉表明泥土(tǔ),剪成1cm左右(yòu)見方碎片,取樣(yàng)品1g,放入燒杯(bēi)或提取瓶中(zhōng),加入5ml緩衝(chōng)溶(róng)液,手搖振蕩1~2Min,或(huò)超(chāo)聲波振(zhèn)蕩30s,浸(jìn)出提取液,靜置3~5min,待用。
對照溶液測試 先於試管(guǎn)中加入50ul酶液和(hé)50ul顯色劑(jì),再加入2.5ml緩衝(chōng)溶液,搖勻後於(yú)37℃放置15min,加入50ul底物(wù)搖(yáo)勻,此時開始反應並顯(xiǎn)色,要立(lì)即(jí)放入(rù)分光光(guāng)度計/紫外可見(jiàn)分光光(guāng)度計(jì)自動(dòng)聯樣品池中,記(jì)錄反應3min時的(de)吸光度。
樣品溶液測試 先於試管中(zhōng)加(jiā)入50ul酶液和50ul顯色劑,再加入2.5mL樣(yàng)品提取液(yè),其他操作與對照溶液(yè)測試相(xiàng)同,記錄反應3min的吸光度(dù)變(biàn)化值。
分光光度計法測農藥殘留主要(yào)優點:穩定性好(hǎo),靈敏性(xìng)高。
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